铁死亡（Ferroptosis）是一种新型的程序性细胞死亡方式，其特征在于铁的依赖性、脂质过氧化物的积累以及抗氧化防御系统的崩溃。这一过程在肿瘤治疗、神经退行性疾病和代谢性疾病的研究中展现了极大的潜力，其独特的死亡机制有别于传统的凋亡、坏死或焦亡方式。为了推动相关疾病机制的研究和药物开发，尊龙凯时小E老师将详细介绍铁死亡细胞模型的制备与检测方案，为科研提供重要的实验工具。

铁死亡的核心机制在于谷胱甘肽（GSH）的耗竭，主要调控通路包括：谷胱甘肽/GPX4通路、FSP1-CoQ10通路、GCH1-BH4通路以及线粒体DHODH-CoQ通路。当谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的活性降低时，细胞内的脂质过氧化物无法通过GPX4催化的还原反应被清除，从而导致脂质过氧化物的积累。此外，二价铁离子（Fe²⁺）通过芬顿反应催化脂质过氧化物的生成，并产生活性氧（ROS），最终诱发铁死亡。

在实验方面，我们建立了能模拟人类疾病中铁死亡过程的细胞模型（如原代细胞和细胞系）以及动物模型（如小鼠和大鼠）。具体实验手段包括CRISPR/Cas9敲除/敲入、shRNA/siRNA敲低、过表达等。关键分子检测方面则包括GSH/GSSG比值、GPX4活性、SLC7A11/xCT蛋白水平及功能、FSP1蛋白水平等。在铁代谢和脂质过氧化代谢的检测上，可选用铁离子探针、铁蛋白水平测定和ROS聚集的流式细胞术与荧光显微镜观察等方法。

以官方下载的实验试剂为例，尊龙凯时提供了多种检测产品，如谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）活性检测盒（货号：E-BC-K883-M）、总谷胱甘酸（T-GSH）/氧化谷胱甘酸（GSSG）比色法检测试剂（货号：E-BC-K097-S）。利用这些产品，研究人员可以高效地检测靶分子，以便深入了解铁死亡的机制。

此外，在体外研究方面，推荐常用的诱导剂和抑制剂。例如，靶向GSH的药物（如顺铂）和靶向铁离子的药物（如血红素）均可用于探索铁死亡的相关机制。对于细胞模型，HepG2细胞、U87和U251胶质母细胞瘤等都是理想选择，研究者可以通过RSL3等刺激剂来诱导铁死亡反应，这些研究将为未来医学研究提供新的方向。

以上是关于铁死亡研究从原理、模型到检测的一整套实战攻略。若您在实验设计、技术细节或相关Protocol实施中有疑惑，欢迎随时联系尊龙凯时的技术团队进行深入讨论与交流。