细胞介绍

HepG2[HEPG2]是一种表现出上皮样形态的细胞系，来源于一名15岁阿根廷白人男性肝癌患者的肝细胞癌。这种细胞能够分泌多种血浆蛋白，例如清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。由Wistar研究所开发的HepG2细胞系具备良好的转染宿主特性，表达包括胰岛素及胰岛素样生长因子II（IGFII）等标志物。其生长特性一般为紧密的片状增殖，早期附着在培养瓶壁形成小岛状结构，后期可能出现多层堆积或悬浮状态。

该细胞系因其良好的贴壁性，广泛应用于肝细胞功能及病毒模型研究。HepG2细胞的培养条件为87% MEM（含NEAA）+ 10% 进口胎牛血清 + 1% L-alanyl-L-glutamine + 1% 丙酮酸钠 + 1% 双抗，培养环境为95%空气与5%二氧化碳，温度设置在37℃。

传代培养

为了维持HepG2细胞的贴壁生长，建议在细胞有脱落时，按照以下步骤进行传代：首先将培养液转移到无菌离心管中，进行离心（125g，3-5分钟），以收集悬浮细胞。轻轻去除培养基，将贴壁细胞消化收集后混匀，进行接种。接着，使用PBS对贴壁细胞进行清洗，添加胰酶以消化。待细胞状态适宜后加入培养基以中和消化反应。最后，将细胞悬液转移至无菌离心管中，计数并重悬至要求的细胞密度，再转移至培养瓶中静置在培养箱中。

细胞冻存

对于细胞冻存，应在细胞密度达到80%以上且活细胞百分率在95%以上时进行。将细胞沉淀用4°C冻存液重悬，每瓶T25细胞分装至一管（1ml/管），并放置于-80℃超低温冰箱中过夜，若需液氮长期保存，需先在-80℃保存至少一天后再转移至液氮罐中。

细胞复苏

从液氮中取出的冻存细胞应迅速在37°C水浴中解冻。为减少污染，需保持冻管瓶盖高于水浴液面。解冻完成后，将细胞内容物转移至含培养基的离心管中，轻轻混匀并离心去除培养基。再重悬细胞并调整至适当密度后转移至新培养瓶中进行培养。

常见问题

1. **培养过程中细胞碎片增多的处理**：细胞内的黑色颗粒是细胞外分泌泡及细胞器的光学效应，无法清除，属于细胞特性。建议优化培养条件以减少颗粒产生。外部黑色颗粒通常是细胞碎片和代谢产物，可用PBS清洗后添加新的培养基。 2. **空泡现象**：HepG2细胞中常见空泡现象，属于正常特性，对细胞生长不影响。 3. **细胞生长缓慢**：可适当增加血清培养浓度，待细胞状态恢复后再调整。 4. **细胞聚团或不贴壁**：血清品牌和pH值对HepG2细胞的贴壁性至关重要，选择合适的低内毒素血清及维持适当pH有助于细胞形成单层。 5. **漂浮细胞多**：传代或复苏后若部分细胞漂浮为正常现象，随着培养，漂浮细胞会逐渐贴壁。 6. **圆形细胞附着现象**：在HepG2培养中，未完全贴壁或处于分裂期的细胞常呈现圆形，无需特别处理。

尊龙凯时提醒您，HepG2细胞对培养条件要求严格，尤其是pH值和血清质量。使用高质量低内毒素的胎牛血清，有助于提高细胞的贴壁能力。请根据实际需求选择适合的培养基，以确保最佳的细胞生长状态。

发表过的文献

截至2024年，HepG2细胞相关文献的引用数总共达72篇，整体影响因子为467.07。以下是几篇代表性的文献：

1. 论文题目：Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat 期刊：Molecular Plant 影响因子：2.75
2. 论文题目：Photodegradation of carbon dots causes cytotoxicity 期刊：Nature Communications 影响因子：14.91
3. 论文题目：Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression by modulating mitochondrial fission and metabolic reprogramming via cyclin-dependent kinase 5 stabilization 期刊：CELL DEATH AND DIFFERENTIATION 影响因子：13.74
4. 论文题目：Site-specific ubiquitination of VDAC1 restricts its oligomerization and mitochondrial DNA release in liver fibrosis 期刊：EXPERIMENTAL AND MOLECULAR MEDICINE 影响因子：12.85
5. 论文题目：Accumulation of nanoplastics in human cells as visualized and quantified by hyperspectral imaging with enhanced dark-field microscopy 期刊：ENVIRONMENT INTERNATIONAL 影响因子：11.8